Основан на определении титра антител и реагинов в положительных, с 4+ позитивностью, сыворотках крови при исследовании их в РСК в уменьшающихся объемах, которые достигаются ступенчатым разведением, изотоническим раствором хлорида натрия от 1:5 до 1:320. Титром исследуемой сыворотки крови принято считать то ее наименьшее разведение, в котором регистрируют задержку гемолиза (резкоположительный результат).

Реакция Колмера (РСК на холод). Особенностью этой реакции является двухфазность температурных режимов, при которых она протекает, и как следствие ее более выраженная чувствительность и способность улавливать антитела в тех сыворотках крови, где в силу их небольшого содержания результаты реакции Вассермана остаются отрицательными.

Обработку испытуемой сыворотки крови и приготовление разведения антигенов производят по той методике, что и для постановки реакции Вассермана. Вместо изотонического раствора хлорида натрия в реакции Колмера используется солевой раствор следующей прописи: в 1 л дистиллированной воды растворяют 0,85 г х. ч. хлорида натрия и 0,1 г х. ч. сульфата магния. Солевой раствор хранению не подлежит, используется однократно, обеспечивает более стойкую фиксацию комплемента на комплексе антиген + антитело, что проявляется более четкими и стабильными результатами реакции. Для индикации результатов реакции Колмера используют раздельно 2% взвесь, эритроцитов барана в солевом растворе и гемолизин, разведенный по удвоенному титру. В реакции Колмера используют гемолитическую сыворотку, консервированную х. ч. нейтральным глицерином в соотношении 1:1, которую хранят в холодильнике. Активность препарата сохраняется в течение 3—4 лет.

Схема титрования комплемента для реакции Колмера отличается от таковой при реакции Вассермана как исходным разведением комплемента, так и выбором рабочей дозы, которая должна содержать две единицы комплемента, абсолютная значимость которых высчитывается по определенной формуле.