Через 18—20 ч после постановки реакции подсчитывают подвижных и неподвижных бледных трепонем в препаратах из опытных и контрольных пробирок при микроанаэростатной методике и в препаратах из опытных и контрольных меланжеров при меланжерной методике. Для этого соответственно количеству меланжеров в штатив расставляют и нумеруют маленькие пробирки (12X60 мм) и после снятия резинового кольца меланжер опускают в соответствующую пробирку. Содержимое меланжера свободно стекает на дно пробирки либо выталкивается из него при помощи резиновой пипетки, надетой на верхний конец меланжера. Этой же пипеткой перемешивают находящуюся в пробирке жидкость и нижним концом меланжера наносят каплю на предметное стекло с целью приготовления препарата для микроскопирования. Для регистрации результатов РИБТ микроанаэростатной методикой содержимое пробирок предварительно перемешивают легким встряхиванием. При помощи пастеровской пипетки наносят на предметное стекло каплю, накрывают ее покровным стеклом и микроскопируют в темном поле зрения с окуляром ХЮ и объективом Х40. Учет результатов РИБТ состоит в определении процента подвижных и неподвижных бледных трепонем. Для этого подсчитывают сначала в препарате из контрольных, а затем из опытных пробирок 25 бледных трепонем и отмечают число подвижных и неподвижных из них.
Меланжерная методика РИБТ
При этой методике испытуемая сыворотка крови, комплемент и антиген помещают не в пробирки, а в меланжеры для подсчета лейкоцитарной формулы крови. Предварительно в двух стерильных флаконах готовят в равных частях смесь антигена с активным комплементом морской свинки (флакон 1) и смесь антигена с инактивированный комплементом (флакон 2). Инактивированную испытуемую сыворотку крови при помощи резиновой трубочки набирают в первый меланжер до метки I, которая находится перед ампульным расширением меланжера, затем из флакона 1 набирают смесь антигена с активным комплементом до метки II, которая находится за ампульным расширением. Оба просвета меланжера закрывают плотно сидящим резиновым кольцом. Во второй меланжер после испытуемой сыворотки крови до метки II набирают из флакона 2 смесь антигена и инактивированного комплемента морской свинки, просветы меланжера также закрывают резиновым кольцом, благодаря чему прекращается доступ воздуха и бледные трепонемы в этот период находятся в относительно анаэробных условиях. Наполненные и закрытые меланжеры помешают в специальный штатив, предварительно надев на каждый нумерованные бирки. Штативы с меланжерами помещают в термостат при 35 °С на 18— 20 ч.
