Методика определения титра аутоантител путем осаждения комплекса непреципитирующее антитело — антиген дробными дозами сернокислого аммония основана на хорошо известном в серологии факте: комплекс антитело — антиген по сравнению с отдельно взятым антигеном и иммунной сывороткой приобретает повышенную чувствительность к осадителям. Образующийся комплекс осаждается дробными порциями насыщенного раствора сернокислого аммония. Преципитат считается специфическим, если он образовался при концентрации соли, которая не вызывала осаждения (или вызывала менее выраженное помутнение) в контроле — иммунной сыворотке в смеси с гетерогенным антигеном.
При определении аутоантител пользуются хлороформными антигенами.
Вначале на сыворотке донора оттитровываются насыщенным раствором сернокислого аммония все испытываемые тестантигены. Для этого в ряд пробирок одинакового диаметра помещают по 1 мл сыворотки донора, разведенной 1:5, затем в каждую из них вносится по 0,5—1 % белка. Через 3—5 мин. после перемешивания последовательно в каждую пробирку добавляют по 0,1 мл насыщенного раствора сернокислого аммония. Смесь встряхивают и вновь в нее добавляют 0,1 мл осадителя. Такую процедуру следует проводить до появления легкого помутнения, исчезающего при встряхивании.
