Люминесцентная микроскопия
С установлением новых острых респираторных заболеваний вирусной этиологии прежние цитологические приемы для диагностики гриппа (десквамация цилиндрического эпителия слизистой оболочки носа, наличие в них цитоплазматических включений) потеряли свое значение. Они свидетельствовали лишь о вирусном респираторном заболевании, но отнюдь не исключительно о гриппе. Наступил дальнейший этап цитологической диагностики острых респираторных заболеваний вирусной этиологии, когда для диагностики стали пользоваться люминесцентной микроскопией.
Было известно, что акридиновые флуорохромы, связываясь с рибонуклеиновой кислотой, придают соединениям ярко-красную флюоресценцию, а с дезоксирибонуклеиновой — зеленую. Этот феномен был использован Н. А. Максимович и В. П. Митченко и др. для выявления внутриклеточных включений и других клеточных изменений при разных вирусных заболеваниях, в частности при гриппе. Этот опыт был перенесен в клинику Т. И. Бужиевской, Т. Я. Лярской и др. для дифференциальной диагностики гриппа, вирус которого содержит рибонуклеиновую кислоту (РНК-вирус), аденовирусного заболевания, открытого к тому времени, возбудитель которого содержит дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК-вирус). Этот метод цитологических исследований позволяет довольно быстро (в течение нескольких часов—экспресс-диагностика) отличить грипп по ярко-красному свечению РНК-включений, содержащихся обычно в цитоплазме клетки, от аденовирусного заболевания, возбудители которого (ДНК-включения) содержатся в ядрах клетки и имеют зеленое свечение. Число включений различно—от одного до нескольких. Рибонуклеаза тушит красное свечение.
Методом люминесцентной микроскопии удалось выявить включения у 57—60% больных гриппом. Включения обнаруживались не только во время лихорадки, но и в первые дни после нормализации температуры, иногда в поздние сроки реконвалесценции. Т. И. Бужиевская наблюдала включения у 63,5% новорожденных, болевших гриппом. Включения при аденовирусных заболеваниях обнаруживались у детей от 25 до 50% в разные вспышки.
Иммунофлюоресценция. Вскоре из группы острых респираторных заболеваний были выделены как самостоятельные нозологические единицы еще некоторые заболевания, вызываемые РНК-вирусами (парагрипп и др.), которые при люминесцентной микроскопии также дают ярко-красное свечение. Таким образом, люминесцентная микроскопия перестала быть основным методом в диагностике гриппа и сохранила лишь вспомогательное значение.
