В ряде случаев в РИБТ можно исследовать сухие сыворотки крови; которые перед постановкой реакции восстанавливают J286 соответствующим объемом изотонического раствора хлорида натрия и с целью стерилизации подвергают 30-минутному кварцевому облучению. Срок годности высушенных сывороток крови для исследования в РИБТ 7 дней с момента приготовления для южных районов или в жаркое время года и 12—15 дней для остальной части России и в более прохладный сезон.
Антиген. В качестве антигена в РИБТ применяют взвесь бледных трепонем, полученную из раннего (7—9-суточного) орхита кролика, зараженного штаммом Никольса или другими, адаптированными на кроликах, штаммами бледных трепонем. С целью получения ранних орхитов для заражения следует брать здоровых кроликов-самцов с массой 2,5—3 кг и отрицательными серологическими реакциями на сифилис. Заражают кроликов введением внутрь яичек 0,5—1 мл взвеси бледных трепонем в количестве не менее 80—100 микроорганизмов в каждом поле зрения. При заражении животного меньшим количеством бледных трепонем (15—20 микроорганизмов в каждом поле зрения) явления сифилитического орхита наблюдаются, как правило, на 14— 18-й день. В это время в организме кролика накапливаются специфические антитела, связанные с сифилитической инфекцией, что делает непригодным орхиты этого кролика для приготовления антигена. Последующее введение кортикостероидных препаратов зараженным кроликам, как это считалось раньше, не является строго обязательным, так как при хорошо отработанной методике заражения животных ранние орхиты могут развиваться и без воздействия кортикостероидных препаратов, что в значительной степени удешевляет постановку этой реакции. Однако при ослаблении штамма в процессе перевивок, что проявляется уменьшением количества бледных трепонем во взвеси из кашицы яичек забитого для работы кролика, нужно непосредственно после заражения сделать кролику внутримышечную инъекцию 20 мг кортизона или гидрокортизона и по 10 мг препарата вводить ежедневно в течение последующих 5 дней.