Приготовление нативного препарата: каплю серозного экссудата, полученного с поверхности исследуемого элемента (эрозии, язвы, мокнущей папулы), помещают в центре тонкого предметного стекла, предварительно обезжиренного смесью спирта и эфира в равных частях. Рядом с ней наносят равную по величине каплю изотонического раствора хлорида натрия; быстро смешав обе капли, покрывают их покровным стеклом. На верхнюю линзу темнопольного конденсора наносят каплю иммерсионного масла или дистиллированной воды, к которой прижимают приготовленный препарат. Микроскопию проводят с объективом X 40 и окуляром X 10 или X 15.
Исследованию на бледную трепонему чаще всего подвергают эрозивные или язвенные элементы на коже и слизистых оболочках. Поверхность их предварительно осторожно очищают ватным или марлевым тампоном, смоченным в изотоническом растворе хлорида натрия, после чего осушают ватно-марлевым тампоном. Затем поверхность эрозии или язвы осторожно поглаживают бактериологической петлей из нихрома, в результате чего через 1—2 мин начинает выделяться
серозная жидкость. Поглаживание следует проводить осторожно, чтобы избежать примеси крови, затрудняющей исследование. Тканевую жидкость для исследования можно получить также путем сдавливания (массажа) пальцами в резиновой перчатке подозрительной эрозии или язвы либо путем создания относительного вакуума с помощью бировской баночки. Следует иметь в виду, что не всегда удается с первого раза обнаружить трепонемы. Исследование нужно проводить повторно, предварительно назначив больному на 1—2 дня примочки из изотонического раствора хлорида натрия.